背景：工業(yè)生產(chǎn)越來越依賴于各行業(yè)的重組微生物。因此，對(duì)于長(zhǎng)期操作可行性，在優(yōu)化操作關(guān)鍵生物體的準(zhǔn)備工作時(shí)應(yīng)注意這一點(diǎn)非常重要。在電轉(zhuǎn)化中，低頻電場(chǎng)脈沖會(huì)增加酵母細(xì)胞的活力，但會(huì)降低其重組 DNA 載體的跨膜。在此，我們研究了將 pGAPZαA-CecMd3cs 轉(zhuǎn)化為 Pichia pastoris GS115 并獲得目標(biāo)重組細(xì)胞的高效生產(chǎn)的最佳參數(shù)。 

結(jié)果：在初始實(shí)驗(yàn)中，我們利用單因素實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)進(jìn)行電穿孔并一式三份測(cè)量矢量轉(zhuǎn)換效率，確定了五個(gè)電壓中的三個(gè) （250-350 V）、脈沖持續(xù)時(shí)間 （9-17 ms） 和脈沖頻率 （1-5 個(gè)脈沖） 作為進(jìn)一步分析的候選值?；谶@些數(shù)據(jù)，我們利用響應(yīng)面方法統(tǒng)計(jì)建模的 Box-Behnken 獲得了每個(gè)參數(shù)的最佳值 。我們發(fā)現(xiàn)，在固定電壓下，影響電轉(zhuǎn)化效率的主要因素是脈沖持續(xù)時(shí)間和頻率。此外，我們確定了脈沖長(zhǎng)度和電壓之間以及脈沖長(zhǎng)度和頻率之間的協(xié)同相互作用。 

結(jié)論：電穿孔的最佳參數(shù)是 275 V 和 3 個(gè)持續(xù)時(shí)間為 15 ms 的脈沖。我們用生物信息學(xué)確定了最佳轉(zhuǎn)化參數(shù)。