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一種優(yōu)化的培養(yǎng)系統(tǒng),用于從植入前胚胎和重新編程體細(xì)胞中高效提取豬擴(kuò)增的潛力干細(xì)胞

豬與人類具有相同的解剖和生理特征,可以作為轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)的大型動物模型。真正的豬多能干細(xì)胞 (PSC) 可以促進(jìn)細(xì)胞和藥物治療的測試。農(nóng)業(yè)和生物技術(shù)可能受益于產(chǎn)生免疫細(xì)胞以研究動物傳染病的能力,以及在干細(xì)胞中輕松編輯豬基因組的能力。在過去的幾十年里,人們一直在密集嘗試從植入前胚胎中分離豬 PSC。我們之前報道了從植入前胚胎和通過重編程多種哺乳動物物種(包括豬)的體細(xì)胞衍生出擴(kuò)增的潛力干細(xì)胞 (EPSC)。豬 EPSC (pEPSC) 無限期自我更新,分化為胚胎和胚胎外譜系,并允許精確的基因組編輯。在這里,我們提出了一種高度可重復(fù)的實(shí)驗(yàn)程序和數(shù)據(jù),即優(yōu)化和強(qiáng)大的豬 EPSC 培養(yǎng)系統(tǒng)及其在從植入前胚胎和重編程體細(xì)胞衍生新 pEPSC 系的用途。這些方案不需要特別的專業(yè)知識,需要 ~4-6 周才能完成。重要的是,我們成功地從體外受精和體細(xì)胞核移植衍生的胚胎中建立了 pEPSC 系。這些新的 pEPSC 系在長期傳代中穩(wěn)健增殖,并且適用于簡單插入缺失和精確基因組編輯,靶向效率高達(dá) 100%。pEPSCs 在體外分化為胚胎細(xì)胞譜系,在體內(nèi)分化為畸胎瘤,并在人滋養(yǎng)層干細(xì)胞培養(yǎng)基中分化為豬滋養(yǎng)層干細(xì)胞。我們在這里表明 pEPSCs 具有獨(dú)特的表觀遺傳特征,特別是 H3K27me3 水平大大低于成纖維細(xì)胞。

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